一种副干酪乳杆菌等混合菌生产的发酵饲料及其制备和应用方法。由副干酪乳杆菌（CICC20296）、枯草芽孢杆菌(ACCC10619)、酿酒酵母(CICC32236)先液体单独发酵培养，再将发酵液按体积比1:1:1混合，接种到固体培养基中混合均匀后，置于密封容器中厌氧发酵，10-37℃培养75~240小时，产品活菌数可达200-300×108cfu.g-1，产品无需干燥直接饲用。本发明提出的发酵饲料的制备方法减少了抗生素的使用，所得到的发酵饲料含有大量的菌体蛋白、丰富的氨基酸和维生素等营养物质，有利于促进肠道菌群平衡，提高禽畜机体免疫力，提高生产性能，降低饲养成本。